需要。色譜柱長期不用時(shí)，關(guān)鍵是做好沖洗、置換保存液、密封、記錄和定期檢查，避免鹽析、微生物生長、固定相水解、柱床干裂或污染物沉積。

1. 長期不用前最重要：先把緩沖鹽洗干凈

如果流動(dòng)相中含有：

磷酸鹽；

醋酸鹽；

甲酸銨/乙酸銨；

離子對(duì)試劑；

無機(jī)鹽；

酸堿添加劑；

不要直接停機(jī)保存。

應(yīng)先用與流動(dòng)相兼容的水相充分沖洗，例如：

純水；

低比例有機(jī)相水溶液；

廠家推薦沖洗液。

目的：

防止鹽析結(jié)晶；

防止篩板堵塞；

防止柱頭污染；

防止泵、管路和柱內(nèi)殘留鹽腐蝕或沉積。

一般可沖洗 10–20 個(gè)柱體積，或至少?zèng)_到基線和壓力穩(wěn)定。

2. 反相柱 C18/C8 的保存方法

常見反相柱包括：

C18；

C8；

C4；

Phenyl；

CN 反相模式；

PFP；

AQ 水相兼容柱。

推薦保存液

通常可用：

70%–90% 甲醇/水

70%–90% 乙腈/水

或廠家說明書推薦溶劑。

很多普通 C18 柱長期保存可用 80% 甲醇水溶液 或 80% 乙腈水溶液。

不建議長期保存于

純水；

純緩沖鹽；

含鹽流動(dòng)相；

強(qiáng)酸或強(qiáng)堿流動(dòng)相；

高比例水相，普通 C18 可能發(fā)生疏水塌陷；

易揮發(fā)后導(dǎo)致柱床干涸的溶劑且未密封。

3. 正相柱的保存方法

正相柱如：

硅膠柱；

正相氨基柱；

正相氰基柱；

二醇基柱。

保存前要避免直接從水相切到正己烷等強(qiáng)非極性溶劑，必須逐步過渡。

常見保存液

正己烷；

異丙醇/正己烷；

正相流動(dòng)相；

廠家推薦保存液。

注意

正相柱怕水分影響活性，長期保存應(yīng)密封，避免空氣中水分進(jìn)入。

4. HILIC 柱的保存方法

HILIC 柱常用于極性化合物，固定相包括：

酰胺；

兩性離子；

氨基；

二醇基；

裸硅膠。

常見保存液

一般使用：

80%–95% 乙腈/水

或 HILIC 初始流動(dòng)相，但不要含鹽長期保存。

如果使用過緩沖鹽，應(yīng)先用高比例水或適當(dāng)比例水/乙腈去鹽，再置換到高比例乙腈保存液。

5. 離子交換柱/離子色譜柱保存方法

離子交換柱差異很大，不建議一概而論。

常見保存原則：

先去除樣品和強(qiáng)吸附雜質(zhì)；

按廠家方法再生到指定離子型；

使用廠家推薦保存液；

避免柱床干涸；

防止微生物生長。

有些水相離子交換柱長期保存可能需要：

低濃度鹽溶液；

含防腐劑的水溶液；

特定 pH 緩沖液；

廠家專用保存液。

但注意：不要隨意用高比例有機(jī)相保存離子交換樹脂柱，可能導(dǎo)致樹脂收縮、性能變化。

6. SEC/GPC 柱保存方法

尺寸排阻柱特別需要小心，因?yàn)樘盍峡捉Y(jié)構(gòu)和柱床穩(wěn)定性很重要。

水相 SEC/GFC 柱

用于蛋白、多糖、生物大分子時(shí)，通常保存于：

廠家推薦緩沖液；

含低濃度鹽和防腐劑的水相；

有時(shí)含 0.02% 疊氮鈉作為防腐劑，但要注意實(shí)驗(yàn)室安全和儀器兼容性。

不建議：

純水長期保存，容易長菌；

高比例有機(jī)相隨意沖洗；

強(qiáng)酸強(qiáng)堿沖洗；

柱子干涸。

有機(jī)相 GPC 柱

用于聚合物分析時(shí)，保存液通常為：

THF；

DMF；

氯仿；

甲苯；

具體取決于柱子和方法。

必須嚴(yán)格按廠家說明，因?yàn)椴煌?GPC 填料對(duì)溶劑兼容性差異很大。

7. 手性柱保存方法

手性柱差異非常大，尤其是多糖衍生物手性柱。

保存前一定要看說明書。

有些手性柱可用：

正己烷/異丙醇；

乙醇；

甲醇；

乙腈；

特定反相保存液。

但有些涂覆型手性柱不能接觸某些溶劑，例如 THF、氯仿、丙酮、乙酸乙酯等，否則可能溶解或破壞手性選擇劑。

8. 生物柱、蛋白柱、親和柱保存方法

例如：

Protein A 柱；

Protein G 柱；

IMAC 柱；

HIC 柱；

蛋白離子交換柱；

抗體分析柱。

通常要：

按廠家程序清洗；

去除蛋白殘留；

用含防腐劑的保存液；

低溫保存，常見為 2–8 ℃；

避免冷凍；

避免柱床干涸。

親和柱尤其不能隨便用強(qiáng)有機(jī)溶劑或極端 pH 保存，否則配基可能失活。

9. 保存時(shí)要不要把柱子放冰箱？

看柱類型。

可以考慮 2–8 ℃保存的

蛋白柱；

親和柱；

部分水相 SEC 柱；

生物大分子分析柱；

廠家要求冷藏的柱。

常溫保存即可的

常規(guī) C18/C8 反相柱；

正相柱；

HILIC 柱；

多數(shù)小分子分析柱。

注意：

不要冷凍；

從冰箱取出后要恢復(fù)到室溫再使用；

防止冷凝水進(jìn)入柱盒或標(biāo)簽脫落；

有機(jī)溶劑含量高的柱子通常無需冷藏。

10. 保存時(shí)的物理保護(hù)

長期不用時(shí)應(yīng)做到：

用合適保存液充分置換；

擰緊柱兩端堵頭；

防止柱內(nèi)溶劑揮發(fā)；

保持柱子水平或放回原包裝；

避免高溫、陽光直射；

避免震動(dòng)和跌落；

不要讓柱子干涸；

標(biāo)簽標(biāo)清楚保存液、日期和最后使用條件。

建議記錄：

柱型號(hào)和序列號(hào)；

最后流動(dòng)相；

清洗步驟；

保存液；

保存日期；

柱壓、柱效或最后一次系統(tǒng)適用性結(jié)果。

11. 再次使用前需要做什么？

長期保存后重新啟用，不要直接進(jìn)樣。

建議：

檢查柱兩端是否漏液、干涸、結(jié)晶；

用低流速接入系統(tǒng)；

先用保存液或兼容溶劑沖洗；

逐步切換到流動(dòng)相；

如果流動(dòng)相含鹽，先保證有足夠水相過渡；

平衡至少 10–20 個(gè)柱體積；

觀察柱壓是否異常；

做空白進(jìn)樣；

做標(biāo)準(zhǔn)品或柱效測試。

12. 簡單總結(jié)

長期不用色譜柱時(shí)，最重要的是：

含鹽流動(dòng)相一定要洗掉；

換成廠家推薦保存液；

兩端密封，不能干；

避免高溫、冷凍和強(qiáng)光；

特殊柱一定按說明書保存；

重新使用前低流速充分平衡。

對(duì)于普通 C18 反相柱，常用做法是：

先用水洗掉鹽，再用 80% 甲醇或 80% 乙腈充分置換，擰緊堵頭，常溫避光保存。